ПРЕЦИПИТАЦИЯ

ПРЕЦИПИТАЦИЯ
ПРЕЦИПИТАЦИЯ. Реакцией П. называется группа реакций, в которых при смешивании преципитирующей сыворотки —преципитина (см.) с антигеном— преципитиноге-н о м получается в положительных случаях осадок-—п рецицитат. Наряду с реакцией П. имеется группа реакций осаждения для диагностики сифилиса (см. ниже), ингредиенты к-рых пока не могут считаться антигеном и антителом в строгом смысле этого слова. Эти реакции будут рассмотрены отдельно. Механизм реакции преципитации, так же как и реакции аглютинации; носит характер реакции между коллоидами. Это проявляется и в количественных соотношениях между преципитином, антигеном и преципитатом: с увеличением количества преципитина или антигена увеличивается количество осадка, однако только до известной границы, а затем количество осадка снова начинает уменьшаться; особенно ясно это выступает при изменении количества антигена. Наблюдаемый при П., как и при аглютинации, феномен задержки и объясняется этим влиянием количественных 13» соотношений. При данных количествах пре-ципитина и антигена количество преципитата тем меньше, чем более разведен раствор. Отличительное свойство реакций П. как реакций иммунитета—дас с п е ц и ф и ч н о с т ь. Пик, Шварц, Мейер, Сарделлии Фишер (Pick, Schwarz, Meyer, Sardelli, Fischer) показали, что водные экстракты из бактерий » тканей преципитино-генны in vivo, тогда.как спиртовые не обладают этик свойством и реагируют только in vitro. Т. о. преципитиногенные свойства и.способность к, П. не идентичны. Липоиды из лошадиной сыворотки вызывают появление антител; Пик предполагает наличие в этих липоидах балка, который и обладает свойствами антигена. Попытки получить липоидные антигены из бактерий успехом не увенчались. Николь (Ni-colle) нашел, что преципитиногенное вещество бактерий растворимо в эфир-алкоголе и выдерживает 5—10-мин. кипячение на голом огне. Гниение, а также переваривание в течение нескольких недель пепсином или трипсином, к-ты и щелочи при подогревании также не уничтожают их антигенных свойств. Винтерберг (Winterberg) не подтверждает данных Николя. Место о б р а з о в а н и я п р е ц и п и-типов. Так же как и по отношению к другим антителам нам мало известен механизм и место образования преципитинов после введения преципитиногена. Большинство авторов объясняет образование преципитинов на основании теории Эрлиха. По Краусу и Левадити, Крау-су и Шифману (Kraus, Levaditi, Schiffmann), после введения преципитиногена внутрибрю-шинно преципитицы появляются в кровяной сыворотке и экстракте из брыжейки, после'подкожного и интравенозщзго введения — только в сыворотке. В виду того, что параллельно с возрастанием количества преципитинов уменьшается число лейкоцитов, Краус предположил, что преципитины образуются в лейкоцитах ■ и эндотелии. По Дунгерну (v. Dungern), на 4— 5-й день после первой инъекции преципитиногена появляются в крови преципитины, на 6—7-й день количество их достигает максимума, а затем наступает падение. При повторном введении очень скоро после него наступает резкое уменьшение, после чего идет вторичный подъем.         , . П р е ц и п и т о и д ы. Под влиянием физ. и хим. воздействий преципитины,: так же как и аглютинины, могут потерять свою способность преципитировать, сохраняя однако способность связывать преципитиногены. Краус предполагает по схеме Эрлиха, что при этом разрушается эргофорная, группа, в то время как гаптофорная группа сохраняется. Такая модификация может быть получена при подогревании прецицитирующей сыворотки до 60°. Гораздо лучше выдерживает нагревание высушенная сыворотка, в к-рой преципитины раз^ рушаются. только при 130°. Преципитат. Видимым проявлением П. является образование преципитата. Последнее находится в зависимости от нек-рых внешних условий. Так, на образование преципитата влияет реакция среды; П. идет в пределах рН=. = 5—9. Нейтральная или слабо-щелочная реакция благоприятны для образования преципитата, еще благоприятнее слабокислая реакция. Резко щелочная реакция его замедляет; темп. (37°) ускоряет П. В начале П. появляется помутнение, к-рое постепенно переходит в хлопья. Последние оседают и над ними остается про- светлившаяся жидкость. Весь процесс протекает с разной скоростью: значительно быстрее в случае зооцреципитации,,чем бактериопреци-питации. В последнем случае он может продолжаться 24 часа,и дальше. Так же.--как и аглютинация, П. при отсутствии электролитов не происходит. Много работ посвящена вопросу о хим. составе преципитата. Он несомненно содержит белковые тела, возможна также липоиды. Источником белков повидимо-му обычно (Moll, Welsch, Chapman и Пик) является антисыворотка. Подтверждением этому служит то, что при количественных определениях белка в преципитате, его оказывается значительно больше, чем содержалось в антигене. Однако, в нек-рых случаях в преципитате найден был и белок, происходящий из преципитиногена. Преципитат обладает большой резистентностью к переваривающим ферментам, нерастворим в минеральных солях, в соде. Мюллер (Th. Miiller) впервые доказал обратимость реакции П. Расщепление на преципитин и пре-ципитиноген может быть произведено к-той и подогреванием. Это удается не ro всех случаях. Как и все реакции иммунитета, реакция П. обладает. видовой специфичностью* если при постановке ее соблюдать определенные требования как в отношении крепости преци-питирующей сыворотки, так и концентрации антигена. При соблюдении этих условий она так же специфична, как и аглютинация. Главное явление, нарушающее специфичность,—-г р у п -повые реакции. Под групповыми реакциями понимают реакцию преципитирующих сывороток не только с белками соответствующего животного, но и с белками близких к нему видов; т. о. противочеловеческая сыворотка дает П. и с белками обезьян, такое же явление наблюдается относительно крови собаки и волка, кролика и зайца, барана, козы и быка. Это свойство П. используется для выявления родства между различными видами животных. Большое количество таких исследований произвел Неталл (Nuttall) над 900 различными видами-крови. Ясно, что благодаря такого рода расширению диапазона реакции специфичность ее испытывает ограничение. Так, поставить диференциальный диагноз между кровью человека и человекоподобной обезьяны не удается. Для устранения этого дефекта предложены разные способы. Вейхардт (Weichardt) предложил пользоваться реакцией насыщения, аналогичной реакции Кастеллани, (Castellani) при аглютинация. К античеловеческой сыворотке два-три раза, добавляется обезьянья сыворотка. Всякий раз осадок П. отфильтровывается. Полученная в результате сыворотка дает с человеческим белком гораздо более резкую реакцию, чем с обезьяньим. По мнению Вейхардта таким способом можно диференцировать даже кровь разных индивидуумов. Однако новейшие исследования сильно ограничивают значение этого способа. Повидимому эти явления зависят от хим. структуры. По исследованиям Ландштейнера (Landsteiner) над диазоти-рованными белками полученные при пользовании ими как антигеном антисыворотки являются наиболее специфичными, однако реагируют как с другими азобелками, так и с нативными белками, из к-рых они приготовлены .—В некоторых случаях получают хорошие результаты, применяя способ перекрестной иммунизации, предложенный по конкретному суд.-мед. поводу Уленгутом (Uhlenhutb). Он иммунизировал зайца сывороткой кролика и кролика сывороткой зайца. Т. к. при такой иммунизации не получается аутоантител (т. е. антител, направленных против белков- того же животного), то кролик дал сыворотку, реагирующую только с заячьей, а заяц—только с кроличьей сывороткой. Аналогичный опыт был им проделан с человечьей и обезьяньей сыворотками. Правда, Такая иммунизация удается не всегда, и сыворотки не всегда обладают достаточно высоким титром. Кроме видовой специфичности имеется т. н. органная специ фи чность. Ха- / рактёрный пример такой органной специфичности дает хрусталик. Антисыворотки, приготовленные с помощью иммунизации хрусталиком, являются специфичными для хрусталика, но не для других белков того же животного. С другой стороны, сыворотка против хрусталика одного животного дает реакцию и с хрусталиком других животных. По исследованиям Уленгута, произведенным над различными животными, белки хрусталика млекопитающих, птиц и амфибий в значительной степени схожи. Это сходство в незначительной степени распространяется и на хрусталик рыб. Объяснение этому нужно искать в том, что хрусталик является чисто эпителиальным экто-дермальным образованием, обособленным от остального животного организма хотя бы уже тем, что он не имеет кровеносных сосудов. До известной степени такое же явление наблюдается по отношению к яичному желтку: соответствующая противосыворотка дает реакцию с желтками разных животных, но не дает реакции с сыворотками или экстрактами из мяса того же вида.—Для диференцирования видов белка в суд .-мед. случаях самым важным объектом являются обыкновенно кровяные пятна (см. ниже).—Реакция П. применяется также в диагностике инфекционных заболеваний (и особенно широко в судебной медицине). В то время как в диагностике человеческих инфекций реакция П. не играет значительной роли, она получила большое значение в нек-рых' случаях в ветеринарии", особенно для диагностики сибирской язвы. Асколи и Валенти (Ascoli, Valenti) при разработке этой реакции исходили из того, что 1) не только экстракты из бактерий, но и из органов инфицированных животных дают преципитаты со специфическими сыворотками, 2) преципитинр-ген очень устойчив по отношению к нагреванию и даже кипячению. Последнее облегчает получение из органов прозрачных экстрактов благодаря коагулированию*белков. На этом основана т. н. термопреципитация при сибирской язве, носящая имя Асколи (см. Асколи-Валеп-ти реакция). Техника: кусочек ткани величиной с горошину+10 см* физиол. раствора в пробирке погружается на несколько минут в кипящую воду. После охлаждения материал фильтруется и прозрачный фильтрат тонкой пипеткой наслаивается в узкой пробирке на сибиреязвенную сыворотку. В пбложительных случаях на границе в ближайшие же минуты получается ясное белое кольцо. В качестве контролей ставится сибиреязвенная сыворотка с экстрактом из нормального органа и сибиреязвенная сыворотка с экстрактом из заведомо сибиреязвенного органа. Шутц и Пфейлер (Schutz, Pfeiler) отдают предпочтение «холодному» способу, «хлороформному экстракту», рри к-ром кусочек органа величиной с орешек растирается с песком, кашица покрывается слоем хлороформа и в закрытом флаконе оставляется на 4—5 часов. После этого хлороформ сливается, вместо него наливается карболи-зованный физиол. раствор NaCI, растирается с кашицей, отфильтровывается. С фильтратом ставится реакция-. Наконец Гофман (Hoffmann) комбинировал хлороформный способ с термо-способом. После обработки хлороформом в течение i/^ часа производится экстракция в течение 4 часов физиол. раствором, затем подогревание в водяной , бане до 80° для выпаривания хлороформа и кипячение в течение 5 минут. В редких случаях дают положительный результат псевдоантракозные палочки. Поэтому диагностика должна принимать во внимание и клиническую картину. Гниение не разрушает преципитиногенных элементов.                             . ■'. . С помощью экстрактов из бактерий сапа или маллеина по предложению Пфейлера и Мис-нера (Miessner) дроцзводится реакция П. на сап. Предложены также реакции П. для инфекционного аборта у коров, паратифозов, шумящей гангрены, краснухи, чумы -рогатого скота, эхинококка. Наибольшее значение имеет реакция при сибирской язве рогатого скота и лошадей, где она оказалась вполне надежной во всех случаях, даже тогда, когда обычные бактериол. методы были недействительны. П р и г отовление преципита-ционных сывороток. Одним из ингредиентов для реакции П. является преципи-тирующая сыворотка, к-рая для всех видов П. готовится путем иммунизации животных соответствующим антигеном. Факторами, влияющими на успешность иммунизации, являются: вид животного, способ приготовления антигена, способ его введения, количество, сроки и промежутки между введением, длительность иммунизации, время кровопускания. Для всего этого нет никаких категорически определенных правил. Для получения бактерио- и зоо-преципитинов лучше всего пригодны кролики. Собаки и морские свинки менее , пригодны (Уленгут). Из крупного скота ослы и козы лучше лошадей. Несмотря на многочисленные предложенные модификации как способа введения антигена, так и приготовления его нужно определенно сказать, что многое зависит от индивидуальности животного. Для приготовления бактериопреципитинов антигеном служат бульонные или смытые физиол. раствором агаровые культуры, убитые подогреванием при 60° в течение часа. Для получения зоопреципи-тинов употребляется чаще всего кровяная сыворотка. Сыворотка реже встречающихся животных может для удобства консервироваться антисептиками или высушиванием при низкой t°, при этом по предложению Лефлера (Loftier) ее можно стерилизовать после высушивания подогреванием до 150°. Наиболее интересными в этом отношении являются коктоанти-гены, т. е. антигены, коагулированные кипячением, тем более, что по указаниям многих авторов таким способом возможно достигается и бблыпая специфичность получаемых сывороток. Фуживара (Pujiwara), основываясь на наблюдениях Шмидта, i Форне и Мюллера (Schmidt, Fornet; Mtiller) над стойкостью антигена, показал, что с помощью свернутого кипячением белка можно получить преципити-рующие сыворотки с высоким титром. Метод заключается в следующем: кровяная сыворотка разбавляется в 10 раз дест. водой, затем добавляется Vs общего объема насыщенного раствора NaCI и несколько капель уксусной к-ты. Все это кипятится на водяной бане Va часа и затем отфильтровывается. Осадок собирается • фильтра, отжимается и сохраняется под толуолом. Для инъекции растирают в ступке 0,02 см* этого белка с 2,0 физиол. раствора и впрыскивают интравенозно кролику. Приготовленный этим способом антиген вполне пригоден для иммунизации. Однако и он в нек-ром количестве случаев дает неспецифически реагирующие сыворотки. Тот же способ может быть применен для приготовления антигена из мяса. При этом антиген менее токсичен при впрыскивании животным, а полученная при помощи его сыворотка лучше реагирует с экстрактом из мяса, чем приготовленная с помощью сывороточного антигена. Способ им м у низации. В общем безразлично, применять ли подкожный, внут-рибрюшинный или интравенозный способ. Ин-травенозное введение антигена, давая вообще говоря лучшие результаты, чем подкожное, связано однако и с большей опасностью анафилактического шока. Обычно применяют впрыскивания по 1—-3 см3 с промежутками в 5—6 дней. По другим авторам лучше укоротить промежутки, чем может быть уменьшается опасность анафилаксии. В то время как одни после кровопускания дают отдых, а затем снова повторяют инъекций и кровопускания, другие, в том числе Уленгут, считают ^ что лучше, получив "пригодную сыворотку, обескровить кро- лика. После того как на .8—10-й день после последней инъекции пробное кровопускание покажет достаточное содержание преципити-нов (см. ниже), животному делается кровопускание частичное'или тотальное. Для частичного самым удобным способом является пункция сердца, причем можно без ущерба для животного получить от кролика до 40 см3 крови, T; е. до 15—20 см3 сыворотки. Для тотального обескровливания можно, обнажив в хлороформном наркозе сонную артерию и наложив зажим на периферический конец ее, выпустить кровь из центрального конца. К преципитирую-щей сыворотке необходимо предъявлять следующие требования: 1) она должна быть прозрачна и не должна опалесцировать, 2) иметь высокий титр, 3) быть специфичной. Для стерилизации и просветления сыворотки ее фильтруют через свечи Беркефельда или, что еще удобнее, через фильтры Зейца. В том и в другом случае фильтрация ведется с помощью водоструйного насоса. Опалесценция сывороток возможно зависит от пищеварения, поэтому рекомендуется кроликов в день кровопускания с-утра не кормить. .                 ' Определение титра антисы-в-о р о т к и. Если оставить в стороне способы, имеющие значение тдлько для специальных работ, как напр. способы Неттала и Инчли или Вассермана и Шютце (Inchley, Schutze), то методами, практически применяемыми, являются два: 1) метод смешивания и 2) кольцевой или метод наслоения. В том и другом случае антиген разводится (для зоопреципитинов кровяная сыворотка физиол. раствором NaCl 1 :1 000, 1 : 10 000, 1 : 20 000), а антисыворотка применяется без разведения. Опыт ставится в 4 пробирках: в I, II, III наливается по 1 см3 разведенной сыворотки, в IV 1 см3 физиол. раствора. При кольцевом методе пипеткой по стенке или сквозь слой антигена осторожно спускается 0,1 см3 антисыворотки, к-рая располагается на дне под антигеном. Титр определяется по пробирке с наивысшим разведением антигена, которое еще дает помутнение или кольцо почти немедленно, самое позднее спустя 1—2 минуты. Титрование бактериопреципитинов не может быть проведено так же точно в количественном отношении, как титрование зоопреципитинов, т, к. определение количества преципитиногена в. случае бактерий чрезвычайно затруднительно и ненадежно. Поэтому имеются предложения исходить из какого-нибудь количества антигена и принять количество преципитинов в 1 см3 сыворотки, протитрованной им, за единицу. Гамбургер и Шур (Hamburger, Schur) предложили определять центрифугированием в градуированных трубочках объем получающегося осадка. Реакция бактериопреципита-ции также может быть поставлена по способу смешивания или по способу наслоения (кольцевая проба). При первом способе к определенному количеству фильтрата, содержащего пре-ципитиноген, напр.. 5 см3, прибавляются нисходящие дозы сыворотки—1,0, 0,5, 0,2 см3. Смесь оставляется при 37° на.24 часа. Во избежание прорастания, к-рое будет мешать оценке реакции, оба ингредиента должны быть стерильны. Иногда реакция наступает только спустя 48 часов. Гораздо яснее кольцевая проба (Ascoli, Hauser), которая производится так же, как ив случае зоопреципитации.—-Затем сыворотка ис-пытывается на специфичность. Для, этого реакция ставится с гомологическим антигеном в* раз- ведении 1 : 1 000 и с разными гетерологически-ми антигенами в разведениях 1 : 200 и 1 : 1 000. Сыворотки, дающие помутнение с гетерологи-ческими антигенами в разведециях 1 : 200, для употребления непригодны. Сыворотка должна храниться на холоду и без доступа света, однако и при этих условиях она постепенно слабеет. Наступающее иногда помутнение преципитационной сыворотки, разлитой в ампулы, может зависеть от разных причин: от бактериального загрязнения (необходимо повторное фильтрование), от выделения белков, к-рое вызывается иногда недостаточной доброкачественностью стекла (осадок можно отцентрифугировать), иногда от холода (муть исчезает при подогревании). Наконец нужно принять во внимание возможность т. н. аутопреципитации, зависящей от одновременного присутствия в сыворотке преципитина и преципитиногена. Это явление особенно обнаруживается при добавлении к одной сыворотке другой, полученной от такого же животного, иммунизированного таким же видом белка. Поэтому смешивание разных порций сывор т-ки не рекомендуется. Она лучше сохраняется в сухом виде (высушивание производится ри t°, не превышающей 45°, в вакууме или аппаратах типа Фауст-Гейма). Недостатком Td ких высушенных сывороток, к-рые сохраняют свою силу весьма продолжительное время, является необходимость сохранения их в особых условиях (вакуум-эксикатор) и опалесценция при . растворении. Оттоленги, Эйслер'и др. (Ottolenghi,. Eisler) предлагают засушивать сыворотку в определенно отмеренных количествах (напр. 0,1 см3) на бумаге, лучше на черной (Эйслер). Широкого распространения этот способ не получил.                                                        Я. Левин. Преципитатные реакции в серодиагностике сифилиса, реакции, при к-рых в смеси люетическои сыворотки с т. н. антигеном получается преципитат, видимый макро- или микроскопически, в то время как нормальные сыворотки появления осадка не вызывают. Название антиген является по существу неправильным, т. к. при введении его животному специфических антител не получается, и он является собственно весьма неопределенным и разнообразным по способу приготовления экстрактом из разных органов разных животных, аналогичным антигену, применяемому при RW. Исторический обзор. Уя^е вскоре после появления RW многие авторы указывали на 11. как на основную причину реакции (Gay и Moreschi; Levaditi, Elias, Porges, Michaelis и другие). Михаелис (1907) первый наблюдал образование макроскоп, преципитата при наслое-' нии неинактивированнои люетическои сыворотки на вод- • ный экстракт из люетическои печени. Однако благодаря недостаточному постоянству результатов наблюдение Михаелиса осталось почти незамеченным. Михаелис правильно истолковал самое явление, указав, что экстракт содержит в себе преципитиноген.а сывбротка—прецшгатин. Якобсталь (Jacobsthal) наблюдал с помощью ультрамикроскопа появление преципитата при смешении Вассер-мановского антигена и сифилитической сыворотки. Эта «оптическая серодиагностика» не получила практического применения благодаря обилию неопределенных и слабоположительных результатов. Брук и Гидака (Bnick, Hirtaka) для придания явлениям П. большего постоянства ввели нек-рые изменения условий как физ. порядка (связывание на холоду, центрифугирование), так и химические (добавление к экстракту смол). Эти реакции также-не получили практического развития, но теоретические указания авторов нашли применение при разработке более совершенных'методов. Начиная с 1917 г., Мейнике (Meinicke) дает целый ряд. осадочных реакций: его первая модификация—«водяная» («Wassermethode») и вторая—«солевая» реакция («Koch-sal zmethode») двухмоментны и имеют сейчас только исторический и теоретический интерес. В них выявилась связь между П. и нарушением солевого равновесия среды. Появившаяся почти одновременно с ними (1918) реакция Закс-Георги (Sachs, Georgi) одномоментна. Чувствительность экстракта повышена добавлением холестерина. Реакция до наст, времени сохранила практическое значение. Вслед зареакцией Закс-Георги одномоментную методику выработал также и Мейнике в своей «третьей модификации». Эта реакция, имевшая практическое применение, в наст, время оставлена и заменена более чувствительными. Появлению хлопьев или осадка в реакциях П. предшествует стадий помутнения. Мейнике, добавляя к своему антигену толуанский бальзам, бензойную к-ту и применив гипертонический раствор NaCl, сделал этот стадий более отчетливым в своей реакции помутнения. Кроме того им разработана техника быстрой реакции просветления. В последние годы особое применение нашли ускоренные реакции Кана (Капп), цитохолевая реакция Закса и Витебского (Witebsky) и реакция Мюллера. Эти реакции являются дальнейшим развитием и усовершенствованием метода Закс-Георги. Берн (Vernes) в своей реакции, представляющей дальнейшую разработку методов Мейнике, сделал попытку объективного измерения силы реакции и инфекции. Наряду с изучением взаимодействия люетических сывороток и экстрактов из органов шло изучение сравнительных свойств люетических и нормальных сывороток и их действия на определенные хим. вещества, причем продуктом этого взаимодействия является преципитат. Как основное свойство люетических сывороток целым рядом авторов была установлена их чрезвычайная лябиль-ность по сравнению с.нормальными сыворотками. Необходимо отметить нек-рые работы из этой области.В 1908 г. Клаузнер (KJausner) показал, что при разведении люе-тической сыворотки дест. водой спустя 1—15 час. стояния при комнатной t° образуется осадок. Осадок состоит из глобулинов сыворотки и растворим в 10% NaCl. Инак-тивированньтё и старые сыворотки не дают реакции Клау-знера. Реакция Клаузнера неспецифична для люеса;' она наблюдается и при других заболеваниях: tbc, злокачественных опухолях, инфекционных заболеваниях. Закс и Альтман (Altmann, 1908) получали преципитат в люетических сыворотках при разведении их 20 %-ным спиртом при добавлении 0,3—-0,5% олеиновокислого натрия, 0,5% мыла, а также растворов лецитина. Добавление мастики усиливает реакцию. Наиболее резкую реакцию преципитации Закс получал при добавлении к люетиче-ской сыворотке деетилированной воды, слегка подкисленной соляной к-той. Эти реакции, не являясь достаточно характерными для сифилиса,указываютна особенную лябилыюстьсифилитических сывороток по сравнению с нормальными. В. 1917 г. Брук (Bruck) опубликовал целый ряд серохим. реакций. При добавлении к сыворотке азотной к-ты выпадает осадок; при добавлении дест. воды осадок нормальной сыворотки полностью растворяется, осадок'же люетических сывороток остается или растворяется только частично. Реакция с азотной к-той совпадает с реакцией Клаузнера. При изучении П. с алкоголем Брук отметил зависимость ее от состояния сыворотки (активная или инактивирован-ная), возраста сыворотки, продолжительности воздей-ствпя азотной к-ты и т. п. Кроме того Брук, исходя из различной по его мнению степени кислотности люетических и нормальных сывороток, выработал реакцию с молочной к-той. В своих работах он отметил, что большинство положительных сывороток отличается повышенной лабильностью глобулина. Бруковские серохимические реакции не имеют практического значения, но являются теоретически ценными для изучения особенностей люетических сывороток. К серохимическим реакциям относится также реакция Гате-Папакостас (Gate-Papacostas); к 1 см3 активной или инактивированной сыворотки добавляют 2 капли продажного формалина. После 20—24-час. пребывания в термостате в люетических сыворотках образуется студенистая полужидкая масса (halbflussige Gallerte), нормальные же сыворотки остаются жидкими. Однако жели-фикацию дают также туб., канцерозные, инфекционные сыворотки. Реакция т. о. служит выражением лябильно-сти физ.-хим. состояния нек-рых сывороток, но не является специфической для сифилиса и потому практического значения не имеет.—Кроме чисто хим. реакции неоднократно делались попытки применить для реакции II. искусственные антигены с определенным липоидным составом, близкие к составу экстрактов, полученных из органов. Поргес и Мейер с этой целью применяли лецитино-вую взвесь; Поргес, Элиас и Нейбауер—взвесь Natrium glycocholicum. Поргес, Герман-Перуц (Herman, Perutz)— суспенсию из холестерина и Natrium glycocholicum Merck. Представляя значительный теоретический интерес, эти реакции дают практически мало специфические результаты. Для; получения более ясных результатов и возможного устранения субъективности при отсчитыва-[1ии реакций были сделаны попытки превратить осадочные реакции в цветные. Удачным оказалось окрашивание антигена MTR краской Victoriablau (Боровская) и Dah-liaviolett (Herxheimer). Помимо облегчения отсчитывали результатов цветные реакции имеют и теоретический лнтерес, так как обнаруживают элективную адсорпцию разных красок и разницу в хим. составе хлопьев при эазличных осадочных реакциях.                      * Природа антигена (экстракта). Ос-^ новой для всех антигенов, применяемых для реакций флокуляции, служат экстракты из мышцы сердца разных животных—быка,- лошади, морской свинки—в свежем или высушенном виде. Многочисленными хим. исследованиями установлено, что экстракты состоят из липоидов, нерастворимых в' ацетоне, гл. обр. из лецитина. Кроме того антиген содержит немного холестерина и следы мылообразных веществ (Klein, Fraenkel). Этот экстракт служит-антигеном только in vitro, но'не является полноценным антигеном в том смысле, что не вызывает образования антител при введении животному. Однако впрыскивание экстракта в смеси с сывороткой, напр. свиной (Sachs), ведет к образованию антител. Т. о. экстракты принадлежат к группе т. н. «гаптенов» (см. Антигены). Чистый лецитин сам по себе не активен и недает флокуляции с люётической сывороткой. Активность экстракта из органов зависит от* целого ряда химически не вполне определенных веществ, связанных с лецитином. Количество сухого остатка различно в разных экстрактах в зависимости от исходного материала. и способа приготовления. Так, антиген Закс-Георги содержит 0,278 г в 100 см3, а экстракт-Мейнике — 0,942. Добавление холестерина, впервые предложенное Заксом, делает экстракты более чувствительными и легче флокулирую— щими, хотя холестерин сам по себе и не является антигеном. Взвесь холестерина в физиол. раЬтворе не обладает устойчивостью, к-рую он приобретает при смешивании с экстрактами из. органов, в частности с содержащимся в них лецитином. Чем более концентрирован экстракт, тем большее количество холестерина он может поддержать во взвешенном состоянии, и тем больше холестерина нужно прибавить для придания экстракту необходимой чувствительности. Поэтому при приготовлении осадочных антигенов обычно прититровывается соответствующее количество холестерина. В наибе-лее употребительных в наст, время реакциях (реакция Кана, цитохолевая Закс-Георги, Мюллер) к экстракту добавляется холестерин. Несколько сходным действием обладают нек-рые смолы, как например толуанский бальзам, бензойная к-та. Эти вещества находят применение в"реакции помутнения Мейнике. Неустойчивые сами по себе, в солевом растворе они стабилизируются липоидами экстракта. Были сделаны попытки приготовления искусственных антигенов и химически определенных веществ; наиболее известен искусственный антиген из смеси гликохолевого натрия и холестерина (Германа Перуц, 1908). В новейшее время Кисе (Kiss) готовит антиген для флокуляции из лецитина и холестерина. Лецитин действует как защитный коллоид в отношении холестерина и поддерживает его во взвешенном состоянии. Искусственные антигены мало пригодны для практических целей, но представляют интерес в теоретическом отношении. Пригодность антигена для преин-питанной реакции зависит не только от его хим. состава, но гл. обр. от определенной дисперсности его взвеси. По неизвестным еще причинам экстракты из органов дают оптимальную-дисперсность, приблизиться к которой с искусственными антигенами пока не удалось. Из свежего органа экстракт получается непосредственной обработкой органа спиртом (Закс); полученная вытяжка либо служит исходным материалом для приготовления ант и- 148: гена (реакция Закс-Георги) либо лее предварительно концентрируется (цитохолевая, антиген Muller'a). В обоих случаях получается Vollex-trakt. При высушивании сердца появляется ряд веществ, нарушающих правильный ход осадочных реакций; вещества эти повидимому идентичны с гемотоксическими составными частями Вассермановского ■ антигена и растворимы в эфире и ацетоне. Для устранения их при приготовлении осадочного антигена из сухих органов порошок предварительно обрабатывается эфиром, ацетоном'и т. п. и затем экстрагируется спиртом (антигены Кана, Мейнике, Верна, -Сигма). Большинство антигенов, применяемых в RW, дает недостаточно лябильвые взвеси и непригодно для осадочных реакций. Наоборот, все осадочные экстракты могут служить также антигеном и для RW. Осадочные антигены применяются в виде взвеси в солевом растворе разной концентрации (0,85—3%). Для достижения нужной лябильности антигены должны обладать подходящей дисперсностью. Для этого их нужно разводить соответствующим образом солевым раствором; кроме того они должны «созреть». Созревание достигается или двух-моментностью разведения (Закс-Георги, Мюллер) или оставлением на 10—-30 мин. после разведения до прибавления к сыворотке (Кан, ци-чсохолевая). .. Сыворотка. Для. получения более специфических результатов почти все авторы рекомендуют применять для осадочных реакций ■ийактивированные сыворотки. Инактивирова-ние стабилизирует сыворотки. Оно производится подогреванием при 52—56° .в течение 20—30 мин. Только Мейнике для своих MTR и MKR рекомендует применение активных сывороток. Инактивирование сывороток по его мнению ведет при этих реакциях к ослаблению «специфичности. Стабилизирование сывороток у Мейнике достигается, применением 2 и 3% раствора NaCl для разведения антигена. В старых, долго сохранявшихся сыворотках наблюдается 2 различных процесса: с одной стороны, стабилизация их, ведущая к ослаблению •их действия, с другой—процесс насыщения СО,, который может вести к неспецифическому выпадению хлопьев.—П рирода реактивных тел сыворотки. Преципи-тирующие свойства сыворотки связаны с глобулинами подобно комплементсвязывающим при Вассермана реакции (см.). Хлопья состоят почти полностью из липоидов экстракта. Вопрос, входят ли туда составные части сыворотки, не разрешен окончательно. Большинство •авторов находило в хлопьях следы глобулинов ■сыворотки; последние тесно связаны с липоидами и трудно растворимы. Реакция Закс-Георги (Lactoreac-tion^ 1918). Антигеном служит экстракт из ■свежего бычьего сердца. Заметив еще при изучении RW повышение чувствительности антигена при добавлении к нему холестерина, Закс использовал это свойство при приготовлении антигена для своей осадочной реакции. Кроме того им было обращено особое внимание на, зависимость чувствительности антигена не только от его хим. состава, но и от его физико-химич. состояния—степени его дисперсности. Более грубая и менее устойчивая взвесь получается при медленном смешивании экстракта с «физиол. раствором; более тонкая и более устойчивая—при быстром смешивании (Sachs, Ron-«doni). На холоду и при комнатной t° появляют- ся иногда неспецифические хлопья: такой преципитат реверсибилен и снова растворяется при 37°.—П ри готовлени е экстр акта. Бычье сердце, освобожденное от сухожилий и жира, пропускают через мясорубку, отжимают и заливают 5-кратным количеством 95°-ного спирта; встряхивают с бусами 4—5 часов, оставляют при комнатной t° до следующего дня. Спустя 24 часа отфильтровывают через бумагу и дают отстояться 2 дня на леднике. Снова отфильтровывают. Фильтрат представляет «первичный основной экстракт». Этот «основной экстракт» разводят 95°-ным спиртом в 2, 3 и 4 раза. К каждому из трех разведений добавляют 1 %-ного спиртового раствора холестерина по 0,3; 0,45; 0,6 и 0,75, получая т. о. 12 различных растворов. Каждый из этих растворов испыты-вается на ряде люетическйх и нормальных сывороток. Обычно хорошие результаты дает следующее разведение антигена: 10 см% основного экстракта 1 : 4 и 0,45 1 %-ного спиртного раствора холестерина". Разведение антигена' для постановки опыта делают 5-кратным количе~ ством физиол. раствора в два момента. Отмеряют в пробирку нужное количество экстракта и быстро смешивают с равным количеством 0,85%-ного физиол. раствора NaCl; встряхивают^ через 5—-30 секунд прибавляют остальной физиол. раствор. Сыворотки применяются в инактивированном виде. Табл. 1. С х е ма п о ст ан о вки о пы т а. Сыворотка...............од         о,1 ФиЗиол. 0,85%-ный раствор ..... 0,4         0,4 Разведенный антиген......... 0,5           — Спирт, разведенный i/e (контроль) . . —         0,5 Оставляют в термостате на 18 — 24 часа. Регистрация результатов производится простым глазом, лупой или еще лучше аглютино-скопом. В положительных случаях появляются хлопья—мелкие или крупные, иногда полностью оседающие на дно с просветлением сверхстоящей жидкости. Нормальные сыворотки остаются равномерно опалесцирующими. Контрольные пробирки прозрачны без хлопьев. Антиген сам по себе также не должен флоку-лировать. Реакция Закс-Георги применялась, как макрореакция (Scheer, Lipp, Kafka). Благодаря постоянству результатов и специфичности она получила очень широкое распространение как у себя на родине, в Германии, так и у нас, а также в Англии и Америке. Существует громадная литература, касающаяся теории и практики реакции Закс-Георги. Цитохолевая р е акция 3 а к с - Витебского (Witebsky, 1928). Преимуществом этой реакции является большая скорость получения результатов. При ее разработке Закс и Витебский руководствовались данными, почерпнутыми из изучения реакции Кана, как-то: применение концентрированного антигена, употребление его в виде грубо дисперсной взвеси, смешивание антигена и сыворотки в нераз-веденном виде, встряхивание смеси. Приготовление антигена. Выпаривают на водяной бане или в вакуум-аппарате «первичный основной экстракт» Закса из свежего бычьего сердца (см. выше). Полученный вязкий желтоватый остаток растворяют в горячем спирте в объеме х/з выпаренного экстракта. Оставляют на 2—3 суток при комнатной t°; выпадает осадок, плотно пристающий к дну и стенкам сосуда; прозрачный экстракт сливают и добавляют от 0,2% до 0,6% холестерина. Количество добавляемого холестерина устанавливает- ся эмпирически на ряде люетич. и нормальных •сывороток. Холестеринизированный экстракт стоек при хранении и постоянен в своих свойствах.—П остановка о п ы т а. К 1 см3 экстракта быстро добавляют 2 см3 физиологич. раствора. Встряхивают, оставляют для созревания на 10—30 мин, Получается грубая мутная взвесь. К 0,2 инактивированной сыворотки добавляют 0,1 разведенного экстракта. Встряхивают 2—3 мин. Оставляют на 15—30 мин., после чего добавляют по 1 слг? физиол. раствора. После этого тут же можно регистрировать ре-, зультаты, В положительных случаях—хлопья или муть. Си гма-р еакци я (£) Д р ей ер и У орда (Dreyer, Ward) представляет модификацию реакции Закс-Георги. Особенностью ее является количественное определение крепости сыворотки введением в реакцию падающих доз сыворотки. Как антиген применяется спиртный холестеринизированный экстракт из телячьего сердца, предварительно обработанного ацетоном (Bordet). Для получения однообразной дисперсности разведенного антигена добавление физиологического раствора производится с помощью специально сконструированных капельниц. Результаты регистрируются лупой через 18—24 часа. Реакция применяется гл. обр. в Англии и Дании. По чувствительности и специфичности не представляет особых преимуществ перед реакцией Закс-Георги, отличаясь значительно большей сложностью постановки. Реакция К а.на (1922—24) представляет дальнейшее развитие,и усовершенствование реакции Закс-Георги. Ее преимущество перед реакцией Закс-Георги заключается как в быстроте, так и в четкости результатов опыта. Благодаря этому реакция Кана получила очень широкое применение как в' Америке, так и у нас в СССР. В нек-рых штатах САСШ реакция Кана официально заменила RW.—-Приготовление антигена. Бычье сердце, освобожденное от жира и сухожилий и пропущенное через мясорубку, высушивается пропусканием струи воздуха при комнатной t°, a затем превращается в порошок. Тщательно извлекается эфиром (3—4 раза). Высушивается, извлекается 5-кратным количеством спирта в течение 2—3 дней при комнатной t0,npn ежедневном встряхивании. К. 100 см3 отфильтрованного экстракта добавляют 0,6 г холестерина (0,6%). Затем определяют, каким количеством физиол. раствора нужно разводить экстракт при постановке опыта. С этой целью к 1 см3 экстракта добавляют 0,8; 0,9; 1,0; 1,1; 1,2 физиол. раствора. Испытывают эти разведения, добавляя физиол. раствор; годно то разведение, к-рое дает растворяющиеся хлопья. На этикетках продажного антигена обычно указано нужное разведение, напр. 1 см3 экстракта +1,1 с.%3 физ." раствора. Табл. 2. Схема постановки р. Кана. ,                 1 проб. 2 проб. 3 проб. Разведенный антиген . . . о,05 0,025 0,0125 Инактивированная сыворотка......... 0,15 0,15 0,15 Пробирки сильно встряхивают в течение 3 минут и оставляют при комнатной t° на 15 минут, после чего прибавляют физиол. раствор: к 1-й пробе в количестве 1 см3, ко 2-й и 3-й по 0,5 см3. При больших постановках при-7 меняется для встряхивания пробирок автома-тич. встряхиватель. Так как в реакции применяют очень малые количества антигена, то для отмеривания их пользуются микропипеткой в 0,1 см3. Регистрация результатов опыта производится немедленно после добавления физиол. раствора невооруженным глазом или на вогнутом зеркале микроскопа. Хлопья особенно хорошо видны в тонком слое жидкости. Реакция Мюллера (1925) характеризуется появлением не отдельных мелких хлопьев, но образованием агломерата хлопьев в виде комка или шара (Ball, Ballungsreaktion). Антигеном служит • концентрированный экстракт с очень большим содержанием холестерина. Реакция по Мюллеру отличается, большой чувствительностью. Может также производиться со спинномозговой жидкостью. Тщательно, разработана техника разведения и температурные условия (17°) при разведении антигена. Результат реакции регистрируется через; 3 часа. Реакция не вошла в широкую лабораторную практику. Кольцевые пробы предложены различными авторами. Еще в 1908 г. Михаелис получал преципитат при наслоении люетиче-ской сыворотки на печаночный экстракт.Приметоде наслоения в некоторых случаях создаются оптимальные соотношения между преципитино-геном и лреципитином. Кодама (Kodama) пользуется для кольцевой пробы спиртным экстрактом из сердца морской свинки, обработанного эфиром. Мурата (Murata) применяет холестеринизированный экстракт из бычьего сердца по- Заксу. Кольцевые реакции при проверке многими авторами .оказались пригодными для серодиагностики люеса, однако широкого распространения они не получили. Реакция Мейник е. Третья модификация, DMR. После ряда, попыток («Wasserme-thode» и «Salzmethode») дать практически применимую реакцию Мейнике: оста-. новился на реакции, известной под названием. «третьей модификации» (Dritte Modifikation, DR).—П р и г о TV о вление спиртного экстракта. Сердечная мышца лошади, освобожденная от жира и сухожилий, пропускается через мясорубку, высушивается при 50—55° и растирается в порошок. К 1 г порошка добавляют 9 см3 чистого эфира, встряхивают 1—2 ч. и оставляют на 18 —24 ч, при комнатной t°. Эфир отфильтровывают через бумажный фильтр и порошок после высушивания; настаивают несколько дней с 9-кратным количеством 95—96°-ного спирта. Фильтруют через бумажный фильтр, отстаивают несколько дней. Снова отфильтровывают. Фильтрат представляет собой «основной экстракт». Чувствительность этого экстракта может быть повышена добавлением бензойной к-ты в количестве 0,3 Д©: 0,5 г на 100 см3. Это т. н. экстракт В. Основной экстракт разбавляется спиртом, количество к-рого определяется для каждого экстракта по нижеследующей схеме. Табл. 3. Схема'титрован и-я -основного экстракта М е й н и к е. ' Пробирка ! Компоненты реакции              -------------—'■- |                                                                1 j . 2 ■ 3              4 [ Основной первичный экстракт ...... °,t о,з        0,2        0,1 Спирт 95—96* ..... 0,1         0,2        0,3        0,1 В каждую пробирку прибавляют по 0,25 дестил. воды, смешивают и оставляют на 1 час. Получается муть различной, степени. Добавляют в каждую пробирку по 3,5 см3 Aq. dest.,, перемешивают, опрокинув пробирки. Вторичное добавление дест. воды (3,5 см3) вызывает в нек-рых пробирках исчезновение мути, появившейся после первого добавления воды (0,25). Пригодным считается то разведение, в к-ром после добавления первой порции воды появилась сначала ясная муть, принимающая постепенно при стоянии непрозрачный молочный вид; от второй порции воды эта муть частично исчезает. Появление слишком резкой мути немедленно после добавления первой порции воды указывает на излишнюю концентрацию экстракта; полное исчезновение мути после добавления второй порции показывает недостаточную концентрацию. На указанных основаниях первичный экстракт разводится для приготовления вторичного рабочего экстракта. Приготовленная из последнего взвесь в солевом растворе служит для постановки опыта. Разведение готового экстракта проводится ex tempore перед постановкой реакции в 2 момента. 1-й момент: к экстракту добавляют половинное количество Aq. dest., встряхивают, оставляют для созревания на 1 час при комнатной t°; 2-й момент: добавляют сразу семикратное по отношению к взятому экстракту количество 2%-ного раствора NaCl.—П остановка реакции: 0,2 исследуемой сыворотки (активной или инак-тивированной) и 0,8 разведенного экстракта хорошо взбалтывают и оставляют до следующего дня в термостате. Регистрация производится на основании появления хлопьев в положительных случаях; отрицательные сыворотки остаются прозрачными; применение активных сывороток возможно благодаря стабилизирующему действию гипертонического солевого раствора (Закс-Георги). DR дает хорошие клин, результаты, но оставлена для других более быстрых и чувствительных способов. Реакции помутнения. В этих реакциях регистрация производится на основании первого стадия преципитации—феномена помутнения смеси, а не на основании окончательного выпадения хлопьев. Реакция; До л ь-д a (Dold)—первая по времени реакция помутнения. Как антиген Дольд применяет холесте-ринизированный экстракт Закса, разбавленный физиол. раствором в 11 раз. В смеси с инакти-вированной сывороткой получается в положительных случаях ясное помутнение, к-рое при дальнейшем стоянии в термостате переходит в хлопья. Интересен предложенный Дольдом «формалиновый контроль» (Formalinserumkon-trole). К пробирке со смесью антигена с сывороткой прибавляют 2 капли формалина, разведенного физиол. раствором 1 : 3. Смесь остается без изменения и служит стандартом для сравнения с основной пробиркой.—Р е а к ц и я помутнения Мейнике (Meinicke Trii-bungsreaktion, MTR). Принцип реакции Дольда был дальше разработан Мейнике, к-рый придал ему больше постоянства и чувствительности, в виде реакции, получившей весьма широкое применение—реакции помутнения Мейнике; Как антиген применяется тот же экстракт из лошадиного сердца, что и для третьей модификации Мейнике, но с примесью толуанского бальзама и разбавленный 3%-ным раствором NaCl. Такой экстракт дает с люётической сывороткой ясное помутнение иногда через 1 час, обычно не позже 4—6 часов. Сыворотка не инак-тивируется. Реакция протекает при комнатной t°. Специфичность зависит от правильно выбранной концентрации экстракта и дозы толуан- ского бальзама.—П риготовление антигена. Готовится из основного экстракта лошадиного сердца (см. выше третья модификация Мейнике). Этот экстракт разводится в зависимости от его концентрации 95—96°-ным спиртом в 5—15 раз. По Лаубенгеймеру( Lauben-heimer), хорошо действующий экстракт содержит приблизительно 0,0157 липоидов в 100 cmz. На 100 см3 экстракта добавляют 3—5 см3 спиртного толуанского бальзама. Чем концентрированней экстракт, тем большее количество толуанского бальзама он может поддерживать во» взвешенном состоянии. Для каждого экстракта. выбирается' эмпирически нужное количество-бальзама. Впоследствии для придания экстракту большей стойкости и чувствительности Мейнике стал добавлять к экстракту 0,3%.бензойной к-ты и около 20% первичного спиртного, экстракта из сердца, не подвергшегося предварительной обработке эфиром (антиген В). Новейшие экстракты отличается стойкостью» и постоянством действия.—П остановка MTR. Антиген разводится 10-кратным количеством 3%-ного раствора NaCl. Отмеренное количество экстракта и солевого раствора наливают в 2 пробирки, подогревают 10 мин. при 45°, смешивают, переливая несколько раз иа одной пробирки в другую. Смесь при падающем свете имеет молочный оттенок, при проходящем—прозрачна. При стоянии опалесценция усиливается, иногда выпадают хлопья, и антиген тогда становится негодным для употребления. Поэтому антиген разводится ex tempore. При больших постановках для стабилизации. антигена его разводят 3%-ным солевым раствором, содержащим 0.1% соды (Na2C03). Табл. 4. Схема постановки MTR с ^антигенами. Компоненты реакции 1 проб. 2 проб.!з проб. 4 проб Неинактивированная сыворотка ..... Антиген А ...... Антиген В ...... Формалин 1/з при комнатной t°...... 0,2 0,2 0,~2— 0,2 0,5 ■— 0,5 0,5 0,5 2 кат 2 кап. Регистрация производится на основании помутнения; оно наступает через 1—4—8 часовт в зависимости от крепости сыворотки. Через 18—-24 часа в положительных случаях выпадает осадок с полным или частичным просветлением жидкости. Предложена двойная регистрация результатов (Elkeles) на основании помутнения и выпадения. При этом выявляется большее количество положительных сывороток и. устраняются неспецифические результаты. Реакция помутнения лучше всего отсчитывается при проходящем свете: на расстоянии 1—2 м рассматривается через пробирку переплет окна; в положительных случаях переплет окна нельзя разглядеть. MTR имеет очень широкое распространение. Реакция MTR пригодна для постановки в виде микрореакции, что иногда ценно в детской практике. Большую каплю крови из пальца или ушной мочки набирают в капиляр, запаивают один конец, после свертывания центрифугируют, отламывают капиляр на уровне сьворотки и наносят на предметное стекло платиновой петлей (2 мм); рядом петлей в 5 мм наносят каплю разведенного анг-тигена, смешивают их, покрывают покровным стеклом и оставляют во влажной камере на 1 час. Рассматривают с увеличением в 400—500 раз или с затемненным полем зрения. В отрицательных случаях видны мелкие крупинки, изолированные, находящиеся в Броуновском движении; в положительных случаях крупинки .агломерируются в кучки. Результаты микрореакции в общем совпадают с макрореакцией. Реакция помутнения Верна применяется гл. обр. во Франции и Южной Америке. Особзнностями ее являются: 1) точно разработанная техника приготовления антигена (Регё-thynol) (экстрагирование сердечной мышцы спиртом в Сокслетовском аппарате, после предварительной ее обработки perchlorure d'ethy-lene); 2) разведение антигена с помощью специального электрического смесителя; 3) отсчи-тывание помутнения с помощью особого фотометра, шкала к-рого разделена на 500°. Берн считает, что оптическая густота исследуемой -сыворотки вместе с тем является указанием на степень сифилитической инфекции организма. Поэтому он называет свою методику «сифилиме-трией». Такое отождествление понятий силы реакции и силы инфекции является по существу неправильным, и во Франции раздаются возражения против взглядов Верна, так как реакции П. характерны для люетических сывороток, но не являются постоянным специфическим их признаком. Реакция просветления Мейнике {Meinicke Klarungs*ea4ction, MKR) наряду с реакцией Кана, цитохолевой и реакцией Мюллера является весьма чувзтвительной реакцией П. Регистрация результатов делается на-основании полного просветления жидкости в резко положительных случаях и неполного в частичных; в отрицательных случаях содержимое пробирок резко мутно, так же как и в антигене при ■его разведении. Т. о. регистрация тут происходит на основании окончательного стадия П. через 18—24 часа. Как антиген применяется экстракт из бычьего сердца с добавлением большого количества толуанского бальзама. Применяются падающие дозы сыворотки. Реакция просветления пока не получила широкого распространения и мало проверена. Оценка осадочных реакций как метода серодиагностики. Для оценки осадочных реакций собран- большой статистический материал, причем сравнение велось гл. обр. не с клин, данными, а по отношению к RW. Не приводя данных по отдельным осадочным реакциям, можно в общем сказать, что при современных методах П. процент совпадений с RW колеблется от 88% до 97%. Совпадение результатов исследования по RSG и RW достигает по Заксу 94,94% [причем процент ясно • положительных результатов (%+) равен 89,7%, сомнительных (±) —30% и отрицательных (-)—93,7%], по Штерну (М. Stern) —89%, по Нейкирху (Neukirch)—90,5%, по Гетгенсу (Gaethgens)—#4,5%, по данным Гос. вен. ин-та (Финкелыптейц)—94%. Результаты эти неодно; родны у различных авторов, т. к. вообще серо-диагностические методы не дают совершенно одинаковых результатов в различных лабораториях. Расхождения зависят прежде всего от свойств применяемого антигена, затем от индивидуальной техники работника и в большой степени от индивидуальной оценки результатов. Хотя осадочные реакции, так же как' RW, не являются специфическими реакциями в смысле взаимодействия антигена и антитела, однако они являются характерными для сифи- лиса, и нормальные сыворотки лишь в чрезвычайно редких случаях дают положительный результат. При этом нужно еще с большей осторожностью относиться к оценке сыворотки как «нормальной», в виду возможности скрытой инфекции сифилисом. В отношении к случаям несомненного люеса наблюдается более раннее появление положительных результатов при осадочных реакциях, чем при RW; то же относится и к леченным случаям: положительные осадочные реакции исчезают позже, чем положительная RW. Хрон. инфекции—tbc, злокачественные опухоли—иногда дают положительные осадочные реакции, так же как и положительную RW. Известны частые случаи не-. специфических RW при малярии и скарлатине; эти заболевания значительно реже дают неспецифические положительные осадочные реакции. У беременных осадочные реакции также реже дают неспецифические результаты, чем RW. Как выводы отдельных авторов, так и постановления серологической комиссии Лиги наций сводятся к тому, что осадочные реакции представляют ценное д'ополненце к RW, но не могут заменить ее в практической серологии. Поэтомупока нельзя допустить применение осадочных реакций в качестве единств энного метода серодиагностики. Для лабораторной диагностики люеса как правило нужно применять комбинированную методику—RW и осадочные реакции. При всей своей кажущейся простоте постановка осадочных реакций требует лабораторных и в частности серологических навыков. Ни в коем случае осадочные реакции не должны быть достоянием клинического, лечебного врача, как нередко рекомендоватось благодаря их внешней простоте. Отсчитывание результатов осадочных реакций отличается большей субъективностью, чем при RW. В то время как ясно положительные и отрицательные реакции легко определяются, имеется довольно широкая зона т. н. «неопределенных» реакций, отнесение к-рых к положительным или отрицательным зависит от лица регистрирующего. Особенный практический интерес представляют те случаи, где наблюдается расхождение между RW и осадочными реакциями; т. к. обыкновенно это касается леченных или сомнительных случаев, то решать на основании клиники, какая реакция лучше отражает истинное положение дела, часто является невозможным. Но в таком случае процент несовпадений осадочных реакций с RW не является критерием для их клин.*специфичности. При регистрации положительных результатов осадочных реакций нужна особенная осторожность и следует избегать рекордных цифр положительных реакций, т. к. осадочные реакции дают для этого значительно больший простор, чем RW. Как и при RW, особая чувствительность реакции влечет за собой уменьшение специфичности. Поэтому критерием опытного серолога является правильный подбор экстракта и осторожность в оценке результатов. Причины и механизм осадочных реакций при сифилисе—см. Вассер-маиа реакция.—Процент совпадений с RW: Sachs — SG— RW совпадение — 94,94%; по отдельным группам распадается:+ясно положительное совпадение—89,7%, сомнительные (±)—30%, отрицательные (—)—93,7%; Marg. Stern —89%; Neukirch —90,5%; Gaethgens— 84,5%; Гос. вен. ин-т—94%. WR—DMR—SG (Heinemann): все 3 реакции—79,3%, RW+SG— 1S5 I$i 83,2%, RW+DM—83,3%, SGR+DM—92,1%. \ MTR—RW (Dold) —95,5%, MTR —SGR — 97,7%, RW—SGR—MTR—93,7%, Kiefer— 92,l%,Honn—99%. Цитохоль (Гос. вен. ин-т)— 97%; RSG—цитохолёвая—Кай и RW—94;5%. Кан (ГВИ)—95,46%.                       д. Ворог.-кая. Преципитация в судебно-медицинском отношений. Определение вида крови на объектах, подлежащих суд.-мед. исследованию (пятна крови на предполагаемых орудиях преступления и пр.), имеет существенное значение для дела, т. к. от результата исследования нередко зависит судьба лица, подозреваемого в убийстве. Для диференциального распознавания крови в начале устанавливают (микроскопиро-ванием, хим. способами, спектральным анализом) наличие вообще крови в подозрительном пятне и затем только выясняют реакцией П. (Чистовича-Уленгута), какой вид белка имеется в данном пятне, т.е. происходит ли оно от крови человека или животного (барана, лошади, овцы и т. п.). Преципитирующие сыворотки для производства реакции в наст, время приготовляются в Гос. науч.-иссл. ин-те суд. медицины (Москва), в ин-тах суд. медицины в Харькове, Томске и рассылаются в ампулах с приложением наставления. В Гос. научно-иссл. ин-те суд. медицины (по данным лаборанта М. Бронниковой) при производстве реакции П. придерживаются нижеследующей методики: I. Реакция производится как правило со следующими преципитирую- . шими сыворотками: А. Противочеловеческой. Б. Противосывороткой на какой-либо вид животного. При выборе последней принимаются во внимание: 1) показания подозреваемых в преступлении лиц; 2)'свойства преципитирую-щей противочеловеческой сыворотки (см. ниже). II. Все преципитирующие сыворотки,вводящиеся в реакцию, перед опытом проверяются, причем устанавливается: а) титр; требования: положительный результат в разведении 1:10 000 в течение 10 минут; б) специфичность;'требования: в разведениях 1:1 000 чужеродных белков (лошади, быка, барана, свиньи, собаки, кошки, курицы) не дает положительной реакции в течение 30 минут. (Указаны средние требования. В смысле титра допустимы колебания в ту и другую сторону в зависимости от исследования. Специфичность ниже указанной как правило неприемлема.) III. Вытяжка из исследуемого пятна (если пятен на предмете несколько, то они все подвергаются исследованию, причем вытяжка делается отдельно из каждого пятна) должна содержать белок приблизительно в разведении 1:1 000 (не должна быть крепче). При таком разведении наблюдается: слабожелтоватое окрашивание, незначительное образование пены. Вытяжка производится стерильным физиологич. раствором NaCl на холоду (в леднике) в течение 24 часов. Если пятна свежие, срок можно уменьшить, если старые—увеличить (48 часов, 72 часа). IV. Реакция ставится следующим образом: А. С противочеловеческой сывороткой. 1-я пробирка: вытяжка из исследуемого пятна. Рекомендуется при достаточном количестве ее брать вытяжку в различных концентрациях (несколько пробирок); 2-я пробирка: вытяжка из ткани, окружающей пятно (без пятен); 3-я пробирка: физиол. раствор NaCl, к-рым производилось экстрагирование; 4-я пробирка: разведение 1:1 000 человеческой сыворотки (или крови); 5-я пробирка—1:1000 лошадиной сыворотки; 6-я—1:1000 бычьей сы- воротки;- 7-я — 1:1 000 бараньей сыворотки; 8-я—1:1000 свиной сыворотки; : 9-я1—1:1000 собачьей сыворотки; 10-я—1:1000 кошачьей сыворотки; Н'-я—1:1 000 куриной сыворотки. Б. По той же схеме ставится реакция с рядом таких же объектов с противосывороткой какого-либо животного (см. выше). V. Количественные соотношения антигена (вытяжки, разведения белка) и антитела (йреципитирующей сыворотки): первого 0,9 см?, второго 0,1см?. VI-Результат реакции учитывается к 30 мин. (цифра средняя, т. к. все зависит от свойств сыворотки). VII. Реакция производится в специальных пробирках небольшого размера, суживающихся книзу. Преципитирующая сыворотка опускается на дно пробирки Пастеровскими пипетками; пробирки и пипетки перед употреблением стерилизуются (в сушильном шкафу) -Для каждой вытяжки берется отдельная Пастеровская пипетка. Понятно, что: реакция П. будет положительная с пятнами, происшедшими от различных выделений человеческого организма, содержащих белок, как-то слюна, носовая и влагалищная слизь, испражнения, а также с пятнами от раздавленных блох и клопов, насосавшихся человеческой крови. Необ-^ •ходимо также помнить, что проявлению биол. реакции могут препятствовать сильное нагревание пятна, примесь хим. веществ; задерживают реакцию земля, кирпич, известка в качестве субстрата кровяного пятна, дубильные вещества, ржавчина и некоторые другие. Невысокие степени гниения не отражаются на ходе реакции. Многочисленные проверочные исследования вполне подтвердили пригодность реакции П. для суд.-мед. целей. Для определения вида крови пользуются также реакцией отклонения комплемента, применяемой при диагностике сифилиса, однако в виду значительной сложности и большей возможности ошибок эта реакция не получила широкого распространения. Как правило такие ответственные ис^ следования должны производиться опытными специалистами.            :               в. владимирский» Лит.: Аксенов, Экспериментальное изучение различных болезней на течение и исход реакции Uhlen-huth'a, дисс, СПБ, 1913; Райски й, Оценка способов первой иммунизации для получения преципитирующих сывороток, Саратов, 1925; Четвериков, К вопросу о практическом судебно-медицинском значении пробы Uhlenhuth'a, дисс, СПБ, 1903; Dold H., Die Prazi-pitine und die Methoden der Prazipitation (Hndb. d. biol, Arbeitsmethoden, hrsg. v. E. Abderhalden, Abt. 13, T. 2, Lief. 19, B.-Wien, 1921); F uj i w а г а К., Die Serum-undHamoglobinpracipitinreaktion in der Praxis dergericht-lich-medizinischen Blutuntersuchung, Deutsche Ztschr. i. d. ges. gerichtliche Med., B. XI, 1928; Kratis R., Bakterienprazipitation und Bakterienprazipitine (Hndb. d. pathog. Mikroorganismen, hrsg. v. W. Kolle, it. Kraus u. P. Uhlenhuth, B. II, Jena—B.—Wien, 1929, лит.); Olbrycht J. u. Snieszko S., Untersuchungenuber Pracipitine, Deutsche Ztschr. f. d. ges. gerichtliche Med., Band XII, 1928; DTilenliutb P.,_ Eine Methode zur Untersuchung der verschiedenen Blufarten im besondern ziimdifferenzialdiagnostischenNachweiss des menschlicheh Blutes, Deutsche med. Wochenschr., 1901; Uhlenhuth P. u. S e i 1 f e r t W., Biologische Eiweissdifferenzierung-mittels der Pracipitation (Hndb. d. pathog. Mikroorganismen, hrsg. v. W. Kolle, R. Kraus u. P. Uhlenhuth, B. Ill, Jena—B,—Wien, 1931, лит.). См. также соотв. главы в основных руководствах, приведенных в лит. к ст. Бак-териология, Иммунитет и Микробиология.

Большая медицинская энциклопедия. 1970.

Синонимы:

Смотреть что такое "ПРЕЦИПИТАЦИЯ" в других словарях:

  • Преципитация — (лат. praecipitatio  «стремительное падение»): Осаждение Преципитация (иммунология)  иммунологическая реакция осаждения …   Википедия

  • преципитация — реакция, осаждение Словарь русских синонимов. преципитация сущ., кол во синонимов: 2 • осаждение (13) • …   Словарь синонимов

  • ПРЕЦИПИТАЦИЯ — (от лат. praecipitatio стремительное падение вниз) иммунная реакция осаждения комплекса антигена с антителом. Реакцию преципитации применяют для диагностики инфекционных болезней, при санитарно гигиеническом контроле и в судебной медицине …   Большой Энциклопедический словарь

  • преципитация — (от лат. praecipitatio  стремительное падение вниз), иммунная реакция осаждения комплекса антигена с антителом. Реакцию преципитации применяют для диагностики инфекционных болезней, при санитарно гигиеническом контроле и в судебной медицине. * *… …   Энциклопедический словарь

  • преципитация — (лат. praecipitatio сбрасывание) осаждение реакция осаждения комплекса антигена с антителом; одна из иммунологических реакций, позволяющих определить содержание антител в сыворотке крови больных или вакцинированных людей, а также иммунизированных …   Словарь иностранных слов русского языка

  • преципитация — precipitation преципитация. Иммунологическая реакция осаждения комплексов антиген антитело, при большом избытке одного из компонентов (антигена или антитела) не происходит; сыворотка после прохождения П. становится истощенной в отношении антител… …   Молекулярная биология и генетика. Толковый словарь.

  • преципитация — (лат. praecipitatio стремительное падение) в иммунологии феномен выпадения в осадок растворенного антигена при взаимодействии с антителом, обусловленный нерастворимостью их комплекса в изотонических жидкостях …   Большой медицинский словарь

  • Преципитация — (от лат. praecipitatio стремительное падение вниз)         осаждение, реакция осаждения комплекса антигена с антителом; одна из иммунологических реакций, позволяющих определить содержание антител (См. Антитела) в сыворотке крови больных или… …   Большая советская энциклопедия

  • Преципитация — I Преципитация (лат. praecipitatio стремительное падение) иммунологическая реакция осаждения из раствора комплекса антиген антитело, образующегося в результате соединения растворимого антигена со специфическими антителами, см. Антиген антитело… …   Медицинская энциклопедия

  • преципитация — преципитация, преципитации, преципитации, преципитаций, преципитации, преципитациям, преципитацию, преципитации, преципитацией, преципитациею, преципитациями, преципитации, преципитациях (Источник: «Полная акцентуированная парадигма по А. А.… …   Формы слов


Поделиться ссылкой на выделенное

Прямая ссылка:
Нажмите правой клавишей мыши и выберите «Копировать ссылку»